| 조익성, , 박효은, 구일모, 이재원, 권유욱, 조현재, 오세일, 김효수 |
연구배경 및 목적
부정맥 치료를 위한 경벽성 병변을 만들기 위해 섬유모세포 주입을 통한 바이오절제술(bioablation)이 시도되고 있다. 하지만 섬유모세포만을 주입해서는 원하는 섬유화 병변을 만들 수 없는데, 세포의 생착 실패가 주원인이다. 본 연구에서는 괴사 억제제의 사용 및 pro-survival 신호로 알려진 Akt 유전자 활성화가 심근에 주입한 섬유모세포의 생착 및 섬유화 유발에 미치는 영향을 평가하고자 하였다.
연구방법 및 결과
지속적으로 enhanced green fluorescent protein(eGFP) 를 발현하는 6주령 transgenic mice로부터 심장을 획득하여 일차 배양을 통해 cardiac fibroblasts(CFs)를 분리하였다. 이를 adenovirus-Akt를 transfection한 군 (Ad-Akt CFs), 괴사억제제 (LGLS-126, LG Life Science)으로 전 처리한 군 (LGLS CFs), adnovirus-ß-galactosidase를 transfection한 군 (대조군, Ad-ß-gal CFs)으로 나누어 hanging-drop method를 통해 세포를 응집배양하여 각각 6주령 C57BL/6J mice의 심근에 주입했다. 주입 후 1시간, 3일, 7일, 14일에 심장을 획득하여 anti-GFP 항체 양성 세포의 수로 생착 정도를 비교하기 위해 면역조직화학염색을 시행하였으며, Masson’s trichrome staining을 통해 섬유화 정도를 비교하였다. 대조군에 비해 유의하게 Ad-Akt CFs군 및 LGLS CFs군에서 anti-GFP 양성 세포가 증가되어 있었으며, 이들 두 군 간에는 유의한 차이가 없었다. 주입된 세포는 Ki67 항체 양성으로 증식하고 있는 상태였으며, 이는 14일 까지 유지되었다. 섬유화 역시 Ad-Akt CFs군 및 LGLS CFs군에서 유의하게 증가되어 있었다.
결론
괴사억제인자 처리 또는 Akt 유전자 활성화를 통한 이식 세포의 기능 향상은 심근 내에 이식된 섬유모세포의 생착을 증가시키고, 이를 통해 심근 내 섬유화를 효율적으로 발생시킨다. 이러한 접근법은 향후 세포치료 효율 향상에 응용 될 수 있을 것이다.
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