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| 프로테옴 분석을 통한 관동맥중재술시 무재관류(no-reflow)와 연관된 체액인자의 규명 |
| 아주대학교 의과대학 순환기내과학교실 |
| 최소연, 탁승제, 윤명호, 최병주, 최정현, 임홍석, 우성일, 황정원, 강수진, 황교승, 신준한 |
배경 및 목적: 관동맥협착질환에서 협착의 제거를 위해 풍선확장술이나 스텐트삽입술같은 관동맥 중재술이 널리 이용되고 있지만, 관동맥의 협착을 성공적으로 제거시킨 후에도 심근의 관류가 이루어지지 않는 무재관류 (no-reflow) 현상은 심근의 손상을 유발하고 나쁜 임상적 예후와 유의한 관련이 있다. 본 연구는 관동맥협착질환에서 관동맥중재술시 무재관류 현상을 보였던 환자의 혈액검체를 가지고 프로테옴 분석을 통해 무재관류 발생과 연관된 체액내 단백질의 존재여부를 규명하고 나아가 시술 시 심근손상을 예측할 수 있는 고위험군을 선별할 수 있는 진단적 기초를 마련하기 위해 계획되었다.
방법: 임상적으로 허혈성 심장질환으로 진단받고 관동맥 조영술을 시행하여 혈관 내경협착이 50% 이상으로 관동맥 중재술이 필요한 환자에서 관동맥 중재술 시에 관동맥조영술상의 TIMI 혈류평가방법으로 무재관류 현상 (TIMI grade 0 또는 1)을 보인 20명을 연구대상으로 하였다. 결과의 분석을 위해 대상 환자군 외에 중재술을 시행하였으나 무재관류가 없었던 비교 환자군 (20명) 및 관동맥 조영술에서 정상 소견을 보인 정상 대조군 (10명)에서 말초혈액과 관동맥내 혈액을 채취하였다. 채취된 혈액은 원심분리를 혈청의 처리하고 냉동보관하는 전처리 과정을 거쳤으며, isoelectric focusing 과정을 거쳐, SDS-PAGE에 의한 2차원 전기영동을 시행하였다. Silver staining을 통해 얻은 단백점들을 progenesis 영상 분석을 시행하였다.
결과: pH 4~7에서 시행한 2차원 전기영동 결과, 무관류 환자군과 비교환자군 또는 정상대조군 사이의 혈장 단백지도상 2개의 영역에서 contrast difference를 보였다. 제 1영역의 특정 단백 spot은 20명의 무관류 환자 중 17명에서 발현이 증가 되었으나 비교환자군은 20명중 3명에서만 증가되었고 정상대조군은 관찰되지 않았다. 제 2영역의 특정 단백 Spot은 20명 환자 중 12명에서 발현되었으며, 비교환자군이나 정상대조군에서는 관찰되지 않았다. 두 영역 모두 spot 강도의 양적분석에서 정상대조군에 비해 유의하게 증가되어 있었다 (제 1영역단백: p=0.04, 제 2영역단백: p=0.02).
결론: 프로테옴 분석을 통해 무재관류 발생과 연관된 체액 내 단백질의 존재 가능성을 확인할 수 있었으며, 향후 분석한 단백 spot을 추출하여 protease 반응으로 절편화하고 이의 분자량 pattern을 mass spectrometry를 통해 분석하여 추출단백을 identification 하는 것이 필요하다.
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